M. J. Bailey, P. Biely, and K. Poutanen, Interlaboratory testing of methods for assay of xylanase activity, Journal of Biotechnology, vol.23, issue.3, pp.257-70, 1992.
DOI : 10.1016/0168-1656(92)90074-J

M. Bergez-lacoste, Conception de Biosolvants À Partir de La Molécule Plateforme Furfural, En Laboratoires Virtuel et Réel, École Doctorale Sciences de la Matière, 2013.

C. Bichot, . Biely, D. Peter, R. Mislovi?ová, and . Toman, Synthèse d'alcool furfurylique par voie blanche Remazol Brilliant Blue-Xylan: A Soluble Chromogenic Substrate for Xylanases Biomass Part A: Cellulose and Hemicellulose, Enstib (Epinal) Enzymology, vol.160, pp.536-577, 1988.

R. Boopathy, H. Bokang, and L. Daniels, Biotransformation of furfural and 5-hydroxymethyl furfural by enteric bacteria, Journal of Industrial Microbiology, vol.42, issue.3, pp.147-150, 1993.
DOI : 10.1007/BF01583715

M. Chemin, Valorisation Des Xylanes Du Bois : Vers La Synthèse de Copolymères Amphiphiles Bio-Sourcés, 2014.

M. E. Diaz-de-villegas, P. Villa, M. Guerra, E. Rodriguez, D. Redondo et al., Conversion of furfural into furfuryl alcohol by saccharomyces cervisiae 354, Acta Biotechnologica, vol.10, issue.4, pp.351-354, 1992.
DOI : 10.1002/abio.370120420

A. Doiseau, Déshydratation Catalytique Du Xylose En Furfural, 2014.

T. Gutiérrez, M. L. Buszko, L. O. Ingram, and J. F. Preston, Reduction of Furfural to Furfuryl Alcohol by Ethanologenic Strains of Bacteria and Its Effect on Ethanol Production from Xylose, Biotechnology for Fuels and Chemicals, pp.327-340, 2002.

R. Haapala, S. Linko, E. Parkkinen, and P. Suominen, Production of endo-1,4-?-glucanase and xylanase by Trichoderma reesei immobilized on polyurethane foam, Biotechnology Techniques, vol.15, issue.6, pp.401-407, 1994.
DOI : 10.1007/BF00154311

D. Haltrich, B. Nidetzky, K. D. Kulbe, W. Steiner, and S. ?upan?i?, Production of fungal xylanases, Bioresource Technology, vol.58, issue.2, pp.137-61, 1996.
DOI : 10.1016/S0960-8524(96)00094-6

D. Kristufek, S. Zeilinger, and C. P. Kubicek, Regulation of ??-xylosidase formation by xylose in Trichoderma reesei, Applied Microbiology and Biotechnology, vol.42, issue.5, pp.713-730, 2016.
DOI : 10.1007/BF00171950

Z. Liu, P. J. Lewis, S. W. Slininger, and . Gorsich, Enhanced Biotransformation of Furfural and Hydroxymethylfurfural by Newly Developed Ethanologenic Yeast Strains, Twenty-Sixth Symposium on Biotechnology for Fuels and Chemicals, pp.451-460, 2005.
DOI : 10.1385/abab:121:1-3:0451

A. Mandalika, L. Qin, T. K. Sato, and T. Runge, Integrated biorefinery model based on production of furans using open-ended high yield processes, Green Chem., vol.52, issue.58, pp.2480-89, 2014.
DOI : 10.1002/anie.201207334

T. Matsuzawa, S. Kaneko, and K. Yaoi, Improvement of thermostability and activity of Trichoderma reesei endo-xylanase Xyn III on insoluble substrates, Applied Microbiology and Biotechnology, vol.72, issue.18, pp.8043-51, 2016.
DOI : 10.1016/j.ijbiomac.2014.08.014

K. Poutanen and J. Puls, Characteristics of Trichoderma Reesei?- Xylosidase and Its Use in the Hydrolysis of Solubilized Xylans, Applied Microbiology and Biotechnology, vol.28, pp.4-5, 1988.

H. Rass and . Ait, Transformation Chimique Du Furfural En Acide 2, 5-Furane Dicarboxylique Par Catalyse Hétérogène, 2014.

W. Souza and . Rodrigo-de, Microbial Degradation of Lignocellulosic Biomass PROTOCOLES Protocole nº1 : Repiquer un champignon sur cultures solides Travailler en milieu stérile, c'est-à-dire dans l'environnement d'un bec benzène, 2013.

, Couler dans des boites de pétri un milieu malt/agar à 20%, et laisser refroidir jusqu'à ce que le milieu soit solide. Tremper le scalpel dans de l'alcool et passez le à la flamme jusqu'à évaporation complète de l'alcool

, Ouvrez une boite de pétri du champignon voulu et découpez un carré de 1cm²

, Reposez ce carré dans une nouvelle boite de pétri sur le milieu malt/agar

, Protocole nº2 : mesure de l'activité xylosidase Test du substrat pour effectuer les mesures d'activité

, Préparer une solution de PNP-xylopyranoside à 5mM et diluer la ensuite pour avoir une solution à 2.5mM.Le mélange se

, Prendre une plaque de spectrophotométrie et ajouter dans un puits 150µL de la solution de PNP à 2.5mM. Prélever 2µL de ?-xylosidase et les ajouter dans le puits

, Mettre à chauffer la plaque à 35°C

, Au bout de 20min, stopper la réaction avec de la soude à 0

, Mesurer ensuite l'absorbance au spectrophotomètre à 405nm

, Mesure de l'activité ß-xylosidase dans le milieu de culture

, Prélever dans un eppendorf en milieu stérile 1ml du milieu de culture liquide

, Pour cela rincer à l'éthanol une pipette en verre de 25ml et passez l'extérieur à la flamme

, Mettre ensuite dans un des puits de la plaque du spéctrophotomètre 75µL de la solution substrat validée au préalable de PNP-glucopyranoside à 2, p.5

, Faire chauffer la plaque à 35ºC pendant 20min. Stopper la réaction avec 150µl de soude à 0,1mM

, Protocole nº3 : Mesure de l'activité xylanase

, Remazol Brillant Blue-xylan) avec 5, Préparer une solution de RBB

, Effectuer le mélange réactionnel avec 25 µL d'enzyme

, Ajouter 1ml d'éthanol à 96% et vortexer. Centrifuger ensuite à, 2000.

, Prélever 300 µL du surnageant

. Protocole-n°5, Réalisation de charbon de bois Préchauffer le four à une température de 400°C et enclancher l'atmosphère inerte Prélever une quantité de sciure de bois d'environ 5g

L. 'insérer-dans-la-cuillère-du-réacteur-et-le-fermer-hermétiquement,

, Eteindre le four et le flux de gaz inerte

, Protocole n°6 : Déshydratation du xylose en réacteur fermé Prélever 180mL d'acide acétique

, Peser, vol.1

, Laisser la durée souhaitée à 150°C, agitation 200 tours/min

, Réalisation d'un milieu solide YP Peser : 20g de Bacto-peptone 10g d'extrait de levure Mélanger l'ensemble dans une bouteille et compléter avec 1L d'eau distillée. Stériliser à l'autoclave. Peser : 20g d'agar, Protocole, vol.7

, A la sortie de l'autoclave, mélanger en conditions stériles pour obtenir un mélange à

, ème de solution Bacto-peptone/Extrait de levure en ajoutant 200mL de ce mélange à la solution de glucose

, Protocole n°8 : Réalisation d'un milieu liquide YPD

. Peser-20g-de-glucose,

, Peser 50g d'extrait de levure et 100g de bacto-peptone

, Une fois stérilisés, ajouter en milieu stérile 200 mL du milieu extrait de levure

. Xi-protocole-n°9, Réalisation d'une culture solide de levures Ces manipulations se font en milieu stérile

, Délayer 500 mg de levure de boulanger fraiche dans un peu d'eau distillée

, Une fois la levure en suspension, préparer un rateau à l'aide d'une pipette pasteur

, Etaler à l'aide du rateau sur toute la surface Fermer à l'aide de parafilm et conserver à 28°C,70 % d'humidité relative

, Stériliser une ose : la tremper dans l'éthanol puis chauffer à rouge à la flamme

, Prélever une colonie de levures sur le milieu solide YPD préparé en protocole n°5. L'étaler sur un nouveau milieu solide en trait sur une longueur d'environ 1 cm. Recommencer une dizaine de fois par boite. Filmer à l

, Cette manipulation permet d'obtenir des cultures de taille environ similaires, Protocole n°11 : Inoculer des levures en milieu liquide Ces manipulations se font en milieu stérile

, Stériliser une ose : la tremper dans l'éthanol puis chauffer à rouge à la flamme

, A l'aide de l'ose, prélever une colonie de levures. Tremper l'ose dans le milieu liquide et agiter délicatement pour que la colonie se suspende dans le millieu liquide