Caractérisation immunologique de plusieurs protéines végétales impliquées dans l'allergie alimentaire en vue de la création d'un test de diagnostic sur biopuces - Université de Lorraine Accéder directement au contenu
Mémoire / Rapport De Stage Année : 2012

Immunological characterization of different plants' allergens responsible for food allergy and design of a macroarray as a diagnosis test for food allergy

Caractérisation immunologique de plusieurs protéines végétales impliquées dans l'allergie alimentaire en vue de la création d'un test de diagnostic sur biopuces

Manon Morin
  • Fonction : Auteur
  • PersonId : 779580
  • IdRef : 189968443

Résumé

Food allergy triggers many restrictions in allergic patients' life. A new and more accurate diagnostic test has to be elaborated since the currently available tests are not accurate enough to determine precisely the allergic profile of a patient. A couple of research teams decided to share their knowledge to elaborate a macroarray as a diagnostic tool. This tool enables to test 120 different foods in one trial. In 6 months, 17 extracts of different cereals, spices, legumes and nuts have been produced and characterized by SDS-PAGE.. Six sera from peanut allergic patient have been characterized with immunobloting (western-blot). Moreover some experimental conditions concerning the macroarray tests have been determined thanks to a "biopuce" designed with peanut extract and 3 purified peanut allergens. The tests were carried out with the previous characterized sera and the best conditions were: dilution of the serum 1/5 and its incubation time 1h30. However a lot of new data have to be acquired before being able to statistically assert the validity of this new "biopuce" as a diagnostic tool.
Les allergies alimentaires entrainent d'importantes contraintes dans la vie des patients. Les tests de diagnostic actuels n'étant pas assez efficaces pour établir précisément le profil allergique du patient et mettre en place un traitement personnalisé, le projet DIGALA (Diagnostic de l'ALlergie Alimentaire) propose de mettre au point comme outil diagnostic de ces allergies alimentaires, une biopuce contenant 120 extraits protéiques d'aliments. Durant six mois de stage, dix sept extraits ont été produits, dosés et caractérisés par SDS-PAGE en vue de leur greffage sur la biopuce. Ces extraits de céréales, légumineuses, épices, noix et fruits à coques sont semblables à ceux de la littérature. Six sérums allergiques à l'arachide ont été caractérisés par western blot. D'autre part, des biopuces permettant l'optimisation des conditions expérimentales des tests personnalisés ont été créées à partir d'extraits et de protéines purifiées d'arachide. Utilisées avec les six sérums caractérisés, elles ont permis de définir la dilution du sérum à 1/5 et son incubation d'une durée de 1h30 lors des tests. De nombreux sérums et de nombreuses données statistiques sont encore à acquérir de façon à pouvoir valider ce nouvel outil comme un outil diagnostic pertinent.
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Dates et versions

hal-02093605 , version 1 (09-04-2019)

Identifiants

  • HAL Id : hal-02093605 , version 1

Citer

Manon Morin. Caractérisation immunologique de plusieurs protéines végétales impliquées dans l'allergie alimentaire en vue de la création d'un test de diagnostic sur biopuces. Sciences de l'environnement. 2012. ⟨hal-02093605⟩
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