Mise au point d'un système de transfection des mitochondries
Abstract
Les mitochondries, organelles régissant la production d'énergie dans la cellule, possèdent leur génome propre. La transformation mitochondriale, n'est pas accessible par des méthodes conventionnelles. En agronomie, elle serait pourtant particulièrement utile pour générer des lignées mâles stériles cytoplasmiques (CMS) en sélection variétale. D'autre part de nombreuses maladies neurodégénératives ont été identifiées comme ayant une origine mitochondriale et nécessitent des stratégies de thérapie génique. Dans cette étude, nous avons utilisé la compétence des mitochondries isolées pour étudier l'import et le maintien d'ADN exogène dans les organelles. Nous avons ainsi obtenu la recombinaison d'un ADN importé et l'insertion d'une séquence rapporteur dans l'ADN de mitochondries de plantes. Nous avons abordé l'analyse des modalités de cette recombinaison. Nous avons parallèlement montré l'import d'ADN mitochondrial linéaire entier dans des organelles isolées à partir de cellules humaines. Le problème de la circularisation de l'ADN importé, condition indispensable pour la réplication, a également été abordé in organello. Nos résultats apportent différentes perspectives pour la manipulation génétique des mitochondries, tant chez les plantes que dans les cellules humaines.
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