Suivi du comportement osmotique des plaquettes sanguines : Développement et évaluation d'un test automatique de mesure de la réponse des plaquettes à des variations de pression osmotique - Université de Lorraine Accéder directement au contenu
Thèse Année : 1998

Study of human platelet osmotic behaviour : Development and evaluation of an automated test to measure the platellets response to osmotic pressure variation

Suivi du comportement osmotique des plaquettes sanguines : Développement et évaluation d'un test automatique de mesure de la réponse des plaquettes à des variations de pression osmotique

Résumé

Studying the osmotic resistance of swelling of platelets has often been suggested as a test to access the viability of this cell. this evaluation is of a particular interest to enrich the rheological understandings, to diagnose eventually membrane anomalies and principally to insert it in platelet concentrates quality control before transfusion. A number of authors have analysed the behaviour of platelets in hypotonic media by a variety of complementary methods (cells count, morphology, determinations of substances released,...). Most studies are currently based on the so-called " hypotonic shock response" test (HSR). Yet any platelet viability evaluation technique is standardised, used in reference or does correspond with proper instrumentation. In this study, we describe an automated test using slow dialysis to assess platelet osmotic resistance. The "Fragilimeter", device used routinelly to characterise RBC fragility, has been adapted to the study of platelet osmotic behaviour. The variation in light transmission through a platelet suspension according to NaCI concentration are linked to the change in cellular volume (lysis) and so characterise viability of the cells. This interpretation was dealt with a theoretical approach of platelet optical properties completed by a system response analysis. The results obtained with normal platelets revealed the good reproductibility and sensibility of the technique and the influence to the measures of several parameters : anti coagulant(citrate, EDTA), cellular concentration and temperature. The test was applied to the platelet concentrates quality control for transfusion. This measure device associated with a processing unit permit adaptation for others applications, as HSR test (indeed future platelet aggregation tests), and software evolution for treatment data. Finally the osmotic fragility test can be applied to toher particles or biological cells : spermatozoas, lymphocytes,...The response of different executed tests with Fragilimeter, confirmed by a bilogical validation, permit to complete measure scale actually operational with this commercialised apparatus.
L'étude de la résistance ou du gonflement osmotique de la plaquette sanguine a souvent été proposée comme test d'approche de sa viabilité. Cette évaluation est d'un intérêt particulier pour enrichir les connaissances rhéologiques de cette cellule, pour diagnostiquer d'éventuelles anomalies membranaires et principalement pour l'inclure dans le contrôle de qualité des concentrés plaquettaires avant transfusion. De nombreux auteurs ont analysé le comportement des plaquettes en milieu hypotonique par différentes approches complémentaires (numération, observation morphologique, dosage de substances libérées, agrégation photométrique, etc ... ). Actuellement la majorité des tests cliniques s'appuie sur le test dit de "réponse au choc hypotonique" (RCH). Cependant aucune technique d'évaluation de la viabi lité des plaquettes n'est standardisée, référencée ou n'a fait l'objet d'une instrumentation propre. Dans ce travail, nous décrivons un test automatique d'approche par dialyse lente de la résistance osmotique des plaquettes. Le "Fragilimètre", appareil utilisé en routine pour caractériser la fragilité des érythrocytes, a été adapté pour l'étude du comportement osmotique des plaquettes. La variation de transmission lumineuse à travers la suspension plaquettaire en fonction de la concentration en chlorure de sodium est dépendante du changement de volume de la cellule (de salyse), et permet ainsi de caractériser la viabilité de la cellule. Cette interprétation a fait l'objet d'une approche théorique des propriétés optiques de la plaquette, complétée par une analyse de la réponse du système. Les résultats obtenus avec des plaquettes normales montrent une bonne sensibilité et reproductibilité de la méthode, ainsi que l'influence sur les mesures de plusieurs paramètres : anticoagulant (citrate, EDTA), concentration cellulaire et température. Le test a été appliqué au contrôle de qualité des concentrés plaquettaires conservés en vue de transfusion. Ce dispositif de mesure, associé à une unité informatique, autorise des adaptations pour d'autres applications comme le test RCH, et des évolutions logicielles de traitements de données. Enfin, le test de fragilité osmotique peut s'adresser à d'autres particules ou cellules biologiques : spermatozoïdes, lymphocytes, .... La réponse des différents tests effectués avec la Fragi limètre, confortée à une validation biologique, permet de compléter la gamme de mesures actuellement opérationnelle à l'aide de cet appareil commercialisé.
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Dates et versions

tel-01748368 , version 1 (29-03-2018)

Identifiants

  • HAL Id : tel-01748368 , version 1

Citer

Thierry Gigout. Suivi du comportement osmotique des plaquettes sanguines : Développement et évaluation d'un test automatique de mesure de la réponse des plaquettes à des variations de pression osmotique. Médecine humaine et pathologie. Université Henri Poincaré - Nancy 1, 1998. Français. ⟨NNT : 1998NAN11015⟩. ⟨tel-01748368⟩
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