Application de la PCR en temps réel au diagnostic des candidémies - Université de Lorraine Accéder directement au contenu
Mémoire / Rapport De Stage Année : 2004

Real time PCR for diagnosis of candidiasis

Application de la PCR en temps réel au diagnostic des candidémies

Résumé

L'incidence des candidoses invasives est en augmentation depuis ces 30 dernières années ; notamment parmi les patients immunodéprimés. Ces infections à Candida sp., levure commensale du tube digestif, posent un problème diagnostic : colonisation ou véritable invasion ? Devant cette pathologie de pronostic péjoratif, il est nécessaire de fournir au clinicien un diagnostic précoce, rapide et précis permettant l'instauration d'une thérapeutique adaptée. Les outils actuels sont représentés par la culture, d'interprétation difficile selon le prélèvement, les hémocultures de sensibilité insuffisante et des méthodes sérologiques de performances modestes. Afin d'améliorer la sensibilité et la spécificité de ces tests, divers protocoles d'amplification génomique ont été publiés. L'objet de ce travail est le développement d'une technique originale de PCR SYBRGreen[marque déposée]en temps réel sur automate LightCycler[marque déposée]. La cible génomique retenue est l'ADN ribosomal 5.8 S. Notre stratégie diagnostique repose sur une première PCR d'orientation du genre Candida suivie, en cas de positivité, par une seconde amplification utilisant des amorces spécifiques d'espèces. Les 5 espèces de Candida recherchées ici sont les plus incriminées dans les candidoses à dissémination hématogène : Candida albicans, C. glabrata, C. parapsilosis, C. tropicalis et C. krusei. Après avoir développé notre technique sur des suspensions de levure, nous avons chercher à l'appliquer à du sang total de patient.
Fichier principal
Vignette du fichier
SCDMED_T_2004_BEREZIAT_OLIVIER.pdf (23.32 Mo) Télécharger le fichier
Origine : Fichiers produits par l'(les) auteur(s)
Loading...

Dates et versions

hal-01732521 , version 1 (14-03-2018)

Identifiants

  • HAL Id : hal-01732521 , version 1

Citer

Olivier Béréziat. Application de la PCR en temps réel au diagnostic des candidémies. Sciences du Vivant [q-bio]. 2004. ⟨hal-01732521⟩
127 Consultations
1082 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook X LinkedIn More