MS2 bacteriophage's purification and discrimination between infectious and noninfectious phages depending on their surface properties
Purification du bactériophage MS2 et discrimination des phages infectieux et non infectieux par leurs propriétés de surface
Abstract
In case of viral contamination of environment, the determination of particles infectivity is essential for the health risk control. The aim of the present work was to provide information about viral particles surface properties (charge and hydrophobic/hydrophilic balance) to discriminate infectious and non-infectious virus. First of all, virus needed to be purified before further studies. Initially, purification of viral particles (MS2 phage) was evaluated by ion exchange chromatography on DEAE column. It led to a level of purity that seems close to dialysis but required more optimization. Secondly, to compare MS2 phages infectious and noninfectious, we used different methods: the ion exchange chromatography, the aggregation function of pH and adhesion to hydrophobic support. Of these three methods, chromatography provides information on these two types of particles, but still requires significant methodological development phases.
En cas de contamination virale de l'environnement, la détermination de l'infectiosité des particules est indispensable à l'évaluation du risque sanitaire. Ce travail vise à apporter des données sur l'intérêt des propriétés de surface (charge et balance hydrophile/hydrophobe) des particules virales pour la distinction entre virus infectieux et non infectieux. Les méthodes mises en oeuvre nécessitent l'obtention de virus purifiés. Dans un premier temps, la purification de particules virales (phage MS2) par chromatographie à échange d'ions sur colonne DEAE a été évaluée. Elle aboutit à un niveau de pureté qui semble proche de la dialyse mais nécessite une optimisation plus importante. Dans un deuxième temps, nous avons utilisé la chromatographie à échange d'ions, l'étude de l'agrégation en fonction du pH et l'adhésion sur support hydrophobe pour comparer des phages MS2 infectieux et non infectieux. Parmi ces trois méthodes, la chromatographie pourrait apporter des informations sur ces deux types de particules mais nécessitera une phase importante de développement méthodologique.
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