Adhésion leucocyte/endothélium : approches de l'interaction entre molécules d'adhésion LFA-1 et ICAM-1 par micropipette et chambre d'écoulement - Université de Lorraine Access content directly
Theses Year : 2002

Leukocyte/Endothelium adhesion : appproaches of the interaction between adhesion molecules LFA-1/ICAM-1 by micropipette and flow chamber

Adhésion leucocyte/endothélium : approches de l'interaction entre molécules d'adhésion LFA-1 et ICAM-1 par micropipette et chambre d'écoulement

Abstract

The aim of this work is to investigate the interaction of cell adhesion molecules LFA-1 and ICAM-1 by micropipette and flow chamber techniques. Two micropipettes hold respectively one SKW-3 (human T cell leukemia cell line) expressing LFA-1 and one red blood cell coated with soluble ICAM-1. Based on a stochastic model and a mechanical model of cell adhesion, dynamic parameters of adhesion are obtained. The firm adhesion of leukocytes on HUVEC under different shear stresses is studied by flow chamber. Experimental results show that the adhesion probality (Pa), the forward rate constant (kf) and the affinity (Ka), are increased with SKW-3 cells stimulated by Phytohemagglutinin (PHA) or ebdothelial cells stimulated by the cytokine TNF-[alpha], but tetramethylpyrazine (TMP) can significantly inhibit such increases. The Pa is significant higher for the lymphocytes of the patients with cerebral embolism. It is found that the Pa is similar between micro- and macro-vascular endothelial cells derived from same species (human), but that the Pa was different between microvascular endothelial cells isolated from different species (human and mouse). There are significant positive correlations between Pa and the adhesion force (p
L'objectif de ce travail est d'étudier l'interaction entre les molécules d'adhésion LFA-1 et ICAM-1 par deux techniques : la micropipette et la chambre d'écoulement. Les cellulles d'une lignée lymphocytaire T humaine leucémique (SKW-3) exprimant LFA-1 et les globules rouges revêtus de ICAM-1 solubles ont été mises en contact à l'aide de deux micropipettes. A partir d'un modèle mécanique et d'un modèle stochastique d'adhésion, les paramètres dynamiques et mécaniques d'adhésion cellulaire ont été obtenus. L'adhésion ferme de leucocytes sur la monocouche de cellules endothéliales a été étudiée par la chambre d'écoulement sous différentes contraintes de cisaillement. Nos résultats expérimentaux montrent que la probabilité d'adhésion (Pa), la constante de formation de liaisons moléculaires (Kf) et l'affinité (Ka) sont augmentées pour les cellules SKW-3 stimulées par la phytohémagglutinine (PHA) et pour les cellules endothéliales stimulées par la cytokine TNF-[alpha], mais la tétraméthylpyrazine (TMP) peut inhiber cet effet. Pa est augmentée pour des lymphocytes chez des patients atteints d'embolie cétébrale. Les résultats sont similaires pour les cellules micro- et macro- vasculaires humaines, mais les valeurs de Pa pour les cellules microvasculaires humaines sont augmentées significativement par comparaison aux cellules murines. Nous avons également mis en évidence une relation significative entre Pa et la force d'adhésion (p<0,001) et une corrélation entre Pa et le nombre de leucytes fermement adhérés à l'endothélium (Nad).

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Cite

Hong Zhao. Adhésion leucocyte/endothélium : approches de l'interaction entre molécules d'adhésion LFA-1 et ICAM-1 par micropipette et chambre d'écoulement. Autre. Université Henri Poincaré - Nancy 1, 2002. Français. ⟨NNT : 2002NAN10309⟩. ⟨tel-01747038⟩
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