Preparation and culture of protoplasts from different types of oak material (quercus robur L.) : leaves of seedlings plantlets ; leaves and callus of vitroplantlets. Comparison between two clones which had different age and provenance
Préparation et culture de protoplastes à partir de différents types de matériel chez le chêne pédoncule (quercus robur L.) : feuilles de semis, feuilles et cals de vitroplants. Comparaison de deux clones d'âge et de provenance différents
Résumé
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Le premier volet de ce travail a été consacré à la définition d'une méthodologie de base pour l'isolement, la purification et la culture de protoplastes de chêne (quercus robur L.). Deux types de matériel ont été utilisés : des semis (feuilles immatures ou matures) et des vitroplants (feuilles immatures ou matures, cals de feuilles, cals d'entre-nœuds, cals de base de vitroplants). Les protocoles de préparation ont été optimises pour chaque type de matériel. Le milieu de culture optimum est le WPM#K dans lequel des agregats comportant plus de 10 cellules ont été obtenus. Dans le second volet, les méthodologies définies précédemment ont été utilisées pour comparer les aptitudes de 2 clones d'âge et de provenance différents à donner des protoplastes actifs. Cette comparaison a révélé que quelles que soient les conditions de culture, ce sont toujours les protoplastes (protoplastes de feuilles ou de cals de vitroplants) du clone le plus jeune qui donnent les meilleurs résultats en terme d'activité mitotique