Étude des gènes de la sexualisation de la gonade chez Pleurodeles waltl - Université de Lorraine Access content directly
Theses Year : 2004

Genes of gonadal sex differentiation in Pleurodeles watl

Étude des gènes de la sexualisation de la gonade chez Pleurodeles waltl

Sandra Kuntz

Abstract

ln the urodele amphibian Pleurodeles waltl, the genetic sex detennination is influenced by temperature : genetically female larvae develop in fertile males when bred at 32°C during the thennosensitive period (stages 42-54). Aromatase, the estrogens enzyme synthesising, plays a key role in female gonadal differentiation. Our initial goal was to detennine if the rise of aromatase activity observed at the onset of sexual differentiation (stage 52) was related to an up regulation of expression. The cDNA of aromatase was isolated. Its expression is more important in control females than in males or in heated females. However, compared to enzyme activity, this difference is weak and is delayed (stage 54). Thus, post-transcriptionnal modifications could be involved in addition to transcritional regulation. Genes that are supposed to act upstream of aromatase were then studied. The cDNA of SfI, Dmrtl and Sox9 were isolated. Their expression in the complexes gonads-mesonephros is detected as early as stage 42. At stage 55, sn is overexpressed in female gonads. So these changes appear after those affecting aromatase expression, suggesting a regulation of SfI by estrogens. Dmrtl is alternatively spliced at larval stages and its expression is stronger in female gonads at stage 55. ln juvenile larvae, the expression stops in ovary and becomes testis-specific. Sox9 does not present any differential expression during gonad development. ln addition, analyses of SfI and aromatase expression in brain disagree with a role of central nervous system as a relay during gonadal differentiation.
Chez l'amphibien urodèle Pleurodeles waltl, le détenninisme génétique du sexe est influencé par la température : les larves génétiquement femelles évoluent en mâles fertiles lors d'un élevage à 32°C pendant la période thennosensible (stades 42-54). L'aromatase, enzyme qui synthétise les oestrogènes, joue un rôle clef dans la différenciation femelle. Notre but initial était de détenniner si les différences d'activité enzymatique observées lors de la différenciation sexuelle (stade 52) étaient liées à des différences d'expression. L'ADNc de l'aromatase a été isolé. L'expression est plus importante chez les femelles témoins que chez les mâles ou les femelles chauffées. Cependant, par rapport à l'activité, cette différence est faible et s'observe tardivement (stade 54). Des modifications post-transcriptionnelles interviennent donc vraisemblablement en plus des modifications transcriptionnelles. Pour expliquer ces dernières, nous avons étudié d'autres gènes susceptibles d'agir en amont de l'aromatase. Les ADNc de sn, Dmrtl et Sox9 ont été isolés. Leur expression dans les complexes gonades-mésonéphros est précoce (stade 42). Au stade 55, sn est surexprimé chez les femelles mais cela est postérieur aux changements qui affectent l'aromatase, suggérant une régulation de SfI par les oestrogènes. Dmrtl fait l'objet d'un épissage alternatif chez les larves et l'expression est plus forte dans les gonades femelles au stade 55. A l'état juvénile, l'expression cesse dans l'ovaire alors qu'elle est spécifique du testicule chez les mâles. Sox9 ne présente pas d'expression différentielle au cours du développement. Par ailleurs, les analyses portant sur sn et l'aromatase au niveau cérébral sont en désaccord avec un rôle de cet organe comme relais dans la différenciation gonadique.
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Cite

Sandra Kuntz. Étude des gènes de la sexualisation de la gonade chez Pleurodeles waltl. Sciences agricoles. Institut National Polytechnique de Lorraine, 2004. Français. ⟨NNT : 2004INPL036N⟩. ⟨tel-01749692⟩
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