Etude cinétique de la production de glycéraldéhyde 3-phosphate déshydrogènase par fermentation d'Escherichia coli recombinée
Abstract
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Ce travail débute par une étude comparative entre les souches hôtes et les souches recombinées correspondantes. Ceci a permis de sélectionner deux systèmes hôtes-vecteur : HBIOI(F61a) et G 133(F61a). Un milieu de culture optimisé a été obtenu pour chaque souche. Des études cinétiques en Erlenmeyer, en fermentation discontinue et en semi-continue ont été réalisées afin de comparer les potentialités de ces souches. La souche G133(F61a) semble a priori être la souche la plus intéressante vis à vis de la production d'enzyme. En effet, sa vitesse spécifique de croissance est plus élevée, les rendements en biomasse et en enzyme sont meilleurs, ainsi que sa résistance aux inhibiteurs. Cependant, en fed-batch, une accumulation de glucose et d'acétate dans le milieu de culture pour la souche G133(61a) a été observée. Ce dernier phénomène n'est pas observé avec la souche HB IOI(F61a), bien que le taux de croissance de cette dernière souche soit plus faible. Il ln'y a pas d'accumulation d'inhibiteurs, ainsi la croissance et la biosynthèse peuvent être plus importantes (51 g/l de biiomasse et 6,2 g/l d'enzyme). En conséquence, c'est cette souche qui nous semble devoir être retenue. Un résultat original concerne le fait que le taux de croissance des souches manipulées n'est jamais inférieur à celui des souches hôtes assurant ainsi une stabilité plasmidique