L'objectif général de cette étude est la mise en œuvre optimale d'un nouveau procédé continu de culture d'hybridomes, basé sur une configuration de réacteur agité couplé à un module de fibres creuses permettant le recyclage des cellules par microfiltration tangentielle. Deux grandes parties peuvent être dégagées : la première partie concerne la mise au point technologique du système. Elle inclut à la fois une approche hydrodynamique et environnementale des facteurs pouvant influencer les performances du système en terme de longévité et de productivité. A partir des résultats obtenus en réacteur de deux litres, l'extrapolation au réacteur de vingt litres a été menée à bien et une comparaison des performances avec d'autres systèmes de culture a été faite. Par ailleurs, la seconde partie développe une approche plus approfondie du comportement des hybridomes en réacteur perfusé homogène. L'analyse des exigences nutritionnelles a été réalisée, en faisant varier le temps de séjour et la composition du milieu de culture et en quantifiant les vitesses spécifiques de consommation et de production. De plus, l'état physiologique des cellules (prolifération, décès et lyse) dans ce système de culture, lors des états stationnaires à haute densité, a été caractérisé plus finement par l'analyse du cycle cellulaire, le suivi du relargage de la LDH et par des remises en culture des cellules provenant des réacteurs perfusés. Ces travaux allient une approche technologique liée à la productivité et aux performances et une approche fondamentale liée à l'étude du comportement des hybridomes cultivés à fortes concentrations cellulaires