An unusual effect of NADP + on the thermostability of the nonphosphorylating glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from Streptococcus mutans

Résumé : La calorimétrie différentielle à balayage adiabatique a été utilisée afin d’examiner l’effet du NADP+ sur la dénaturation thermique irréversible de la glycéraldéhyde-3-phosphate déshydrogénase non phosphorylante (GAPN) de Streptococcus mutans. Le complexe binaire GAPN-NADP+ présente une stabilité thermique fortement diminuée, avec une différence d’environ 20 °C entre les températures maximales des pics de transition thermique comparativement à la protéine libre. Ce résultat est similaire à ce qui avait été précédemment décrit sur la déstabilisation thermique de la GAPN consécutive à la liaison d’un phosphate inorganique au site de liaison du substrat. Ceci peut être interprété comme un déplacement de l’équilibre entre deux conformères de la GAPN tétramérique à la suite de la liaison du coenzyme. Une substitution simple d’un acide aminé connue pour abolir la liaison du NADP+ annule l’effet calorimétrique du coenzyme. Fait remarquable, l’inactivation thermique de la GAPN est considérablement ralentie en présence de NADP+, montrant que le changement apparent de stabilité du centre actif peut résulter en des effets opposés à ceux de la protéine entière. Le NADP+ peut aussi réactiver la GAPN* inactive obtenue par chauffage de l’apoenzyme à une température inférieure à la température de transition thermique. Ces effets pourraient refléter un mécanisme qui donne à la GAPN la flexibilité nécessaire aux importantes réorganisations conformationnelles observées précédemment dans le site actif, requises durant le cycle catalytique. La stabilité thermique élevée de l’apoenzyme pourrait, en retour, constituer un élément important pour le maintien d’un niveau constant de GAPN active – une enzyme essentielle à la production d’équivalents réducteurs chez S. mutans et à sa capacité à croître en conditions aérobies.
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https://hal.univ-lorraine.fr/hal-01451525
Contributeur : Imopa Ul <>
Soumis le : mercredi 1 février 2017 - 11:21:16
Dernière modification le : jeudi 11 janvier 2018 - 06:25:29

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Denis Arutyunov, Elena Schmalhausen, Victor Orlov, Sophie Rahuel-Clermont, Natalia Nagradova, et al.. An unusual effect of NADP + on the thermostability of the nonphosphorylating glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase from Streptococcus mutans. Biochemistry and Cell Biology, NRC Research Press, 2013, 91 (5), pp.295 - 302. 〈http://www.nrcresearchpress.com/doi/abs/10.1139/bcb-2012-0104#.WJG1fDi2q5I〉. 〈10.1139/bcb-2012-0104〉. 〈hal-01451525〉

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