Développement de nouveaux immunoconjugués pour l'activation directe du complément à la surface de cellules infectées par le VIH
Résumé
One of the main barriers to HIV eradication is the presence of latent viral reservoirs in infected patients. In this context, the LIH is working on a “shock and kill” strategy by targeting latent cells infected by HIV with heteromultimerrs able to activate the MAC to their surface and induce their cell lysis. In the current work, this innovative immunotherapy has been tested on FLYgp120 cells with multimers expressing a scFv antigp120 antibody and the positive regulator of C3b, complement factor H-related protein 4 (FHR4) . Multimers have been produced by transfection of HEK293 cells and purified by affinity chromatography on column HIStrap. The tests performed pointed out the potency of multimers to induce a C3b deposit and form C5b9, a critical component of CDC, to the surface of flygp120 cells. High valency FHR4 multimers production remains now to be improved in order to obtain an efficient CDC in cellular models of latency
L’une des principales barrières à l’éradication du VIH est la présence de réservoirs viraux latents chez les patients infectés. Dans ce contexte, le LIH travaille à une stratégie de « shock and kill » en ciblant les cellules latentes infectées par le VIH par des hétéromultimères capable d’activer la formation de MAC à leur surface et d’induire leur lyse cellulaire (CDC). Cette immunothérapie innovante a été testée au cours de ce travail sur des cellules FLYgp120 avec des multimères exprimant un anticorps anti-gp120 (PGT121) et le regulateur positif de C3b, complement factor H-related protein 4 (FHR4). Les multimères ont été produits par transfection de cellules HEK293 et purifiés par chromatographie d’affinité sur colonne HIS trap. Les tests réalisés ont permis de démontrer l’efficacité des multimères à induire un dépôt de C3b et à former du C5b9, composant majeur de la CDC, à la surface des cellules fly-gp120. La production des multimères haute valence FHR4 reste maintenant à optimiser afin d’obtenir une lyse cellulaire efficace dans des modèles cellulaires de latence