Substances naturelles se fixant sur la tubuline : mise en oeuvre d'un criblage par spectrométrie de masse
Abstract
La découverte de nouveaux médicaments par le criblage biomoléculaire est au centre de la recherche pharmaceutique actuelle. La spectrométrie de masse, en tant que technique d analyse fiable, reproductible, sensible, spécifique, compatible avec de nombreux types d échantillons et permettant un débit d analyse conséquent, trouve ainsi sa place dans les stratégies de recherche et développement de nouveaux médicaments. Le but de ce travail était de caractériser finement des extraits de plantes à activité anti-tubuline et de mettre en place et de valider une stratégie de criblage originale, impliquant la spectrométrie de masse comme technique de détection. Son potentiel devait être mis en évidence en l'appliquant à différents échantillons complexes tels que des extraits de plantes. Le protocole que nous avons développé s'articule en trois étapes successives qui sont l'incubation des molécules à tester avec la cible moléculaire choisie (la tubuline), l'élimination des composés non liés et enfin l'analyse par MALDI-TOFMS des composés liés. Notre protocole a fait l'objet d une démarche de validation et les résultats pouvant être obtenus ont été discutés. L'application de notre approche à des extraits bruts de plantes (Colchique d Automne et Pervenche de Madagascar) à permis de mettre en évidence 19 molécules actives se liant à la tubuline.
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