Caractérisation des facteurs de transcription responsables de la virulence chez Toxoplasma gondii
Résumé
Toxoplasma gondii encodes several factors of virulence and invasion which are critical for its survival. The expression of these factors is closely monitored during the cell cycle of the parasite to allow their correct packaging into secretory organelles. However, little information is available on the factors that control the expression of these genes. In this context, we decided to characterize the AP2X-5 protein which belongs to the to the AP2 family of transcription factors. Our results of Immuno-bloting have confirmed that AP2X-5 interacts with another factor AP2, AP2XI-5, which was shown to be involved in regulating expression of virulence factors. Chromatin imùmunoprecipitation analysis allowed us to observe an enrichment of the AP2X-5 proteinat the level of promoters of genes coding for rhoptry proteins, as well as the promoter of the AP2XI-5 gene. Using immunofluorescence, the AP2X-5 protein expression was observed between the S and M phases of the cell cycle but not the G1 phase. These data indicates that AP2X-5 may play a role in regulating expression of important virulence factors.
Toxoplasma gondii possède des facteurs de virulence et d'invasion qui lui sont primordiaux pour sa survie. L'expression de ces facteurs est étroitement contrôlée au cours du cycle cellulaire du parasite pour permettre leur adressage correct dans des organites sécrétoires. Cependant, peu d'informations sont disponibles sur les facteurs qui contrôlent l'expression de ces gènes. Dans ce contexte, nous avons tenté caractériser la protéine AP2X-5, un nouveau facteur de transcription de la famille des AP2 qui pourrait être impliqué dans le contrôle transcriptionnel de l'expression de ces facteurs de virulence. Nos résultats d'Immunoempreinte ont confirmé qu'AP2X-5 interagit avec un autre facteur AP2, AP2XI-5, qui est impliqué dans le contrôle de l'expression des gènes exprimés en phase S et M du cycle cellulaire, y compris les facteurs de virulence. Des analyses d'immunoprecipitation de la chromatine ont permis d?observer un enrichissement de la protéine AP2X-5 au niveau des promoteurs des gènes codant pour des protéines de rhoptrie, ainsi que pour le promoteur du gène AP2XI-5. Enfin, un suivi du cycle cellulaire a permis de confirmer qu'AP2X-5 est exprimé entre la phase S et M. Ces données semblent indiquer qu'AP2X-5 pourrait être impliqué dans le contrôle de l'expression des facteurs de virulence.
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