Isolation and characterization of cholesterol degrading microbes from the human gut - Université de Lorraine Access content directly
Master Thesis Year : 2022

Isolation and characterization of cholesterol degrading microbes from the human gut

Abstract

A high blood cholesterol level can result in Atherosclerotic cardiovascular diseases. In humans, circulating cholesterol gets in contact with the gut microbiota that can transform it to the poorly absorbable coprostanol, resulting in lower blood cholesterol levels. In this study, the number of bacterial cells from the human gut that become metabolically active upon exposure to cholesterol was assessed using BONCAT. Metabolically active cells were sorted using FACS for later identification via 16S rRNA gene amplicon sequencing. Furthermore, a protocol to extract sterols and measure cholesterol and coprostanol via GC TOF MS was developed. Lastly, the isolation of a bacterium growing on a cholesterol-amended, selective medium was completed. Getting a closer look at the human gut transforming cholesterol to coprostanol could lead to alternative therapeutics.
Un taux de cholestérol sanguin élevé peut entraîner des maladies cardiovasculaires athérosclérotiques. Chez l'homme, le cholestérol circulant entre en contact avec le microbiote intestinal qui peut le transformer en coprostanol peu absorbable, ce qui entraîne une baisse du taux de cholestérol sanguin. Dans cette étude, le nombre de cellules bactériennes de l'intestin humain devenant métaboliquement actives lors de leur exposition au cholestérol a été évalué à l'aide de la technique BONCAT. Les cellules métaboliquement actives ont été triées par FACS pour une identification ultérieure par séquençage 16S nouvelle génération. En outre, un protocole d’extraction de stérols et de mesure du cholestérol et coprostanol par GC TOF MS a été développé. Enfin, l'isolement d'une bactérie se développant sur un milieu sélectif contenant du cholestérol a été réalisé. Le fait d'observer de plus près la transformation du cholestérol en coprostanol par l'intestin humain pourrait conduire à des thérapeutiques alternatives.
Fichier principal
Vignette du fichier
SCIENCES_M_2022_ISEMBART_CLEMENTINE.pdf (1.13 Mo) Télécharger le fichier
Origin Files produced by the author(s)

Dates and versions

hal-04586416 , version 1 (24-05-2024)

Identifiers

  • HAL Id : hal-04586416 , version 1

Cite

Clémentine Isembart. Isolation and characterization of cholesterol degrading microbes from the human gut. Microbiology and Parasitology. 2022. ⟨hal-04586416⟩
0 View
0 Download

Share

Gmail Mastodon Facebook X LinkedIn More