Développement d'un contrôle en enzymologie érythrocytaire : application à la glucose-6-phosphate déshydrogénase et la pyruvate kinase - Université de Lorraine Accéder directement au contenu
Thèse Année : 1991

Développement d'un contrôle en enzymologie érythrocytaire : application à la glucose-6-phosphate déshydrogénase et la pyruvate kinase

Mostafa Fati
  • Fonction : Auteur
  • PersonId : 787199
  • IdRef : 144544067

Résumé

Non disponible / Not available
Le diagnostic des érythroenzymopathies est fondé sur la mise en évidence de la baisse d'activité de l'enzyme dans les hématies. Cette mesure est délicate pour les raisons suivantes : préparation et conservation des réactifs, précision de la température et du pH, stabilité de l'enzyme au cours du temps. L'inexistence de solutions de contrôle adaptées à l'enzymologie érythrocytaire constitue un handicap qui oblige à recourir à un hémolysat préparé le même jour à partir d'un sujet témoin. L'objectif de ce travail est de préparer un matériel de contrôle destiné aux laboratoires d'analyses médicales pour déterminer des activités enzymatiques et dépister sans erreur les déficits enzymatiques érythrocytaires les plus fréquents, notamment ceux de la glucose-6-phosphate déshydrogénase (G6PD) et de la pyruvate kinase (PK). Le travail est divisé en deux parties : une première partie, exclusivement bibliographique, comprend un rappel des caractéristiques d'une solution de contrôle enzymatique, une revue des méthodes de stabilisation des enzymes suivie de l'étude des propriétés structurales et catalytiques de G6PD et PK érythrocytaires et de leur exploration biologique. La seconde partie rassemble nos travaux experimentaux permettant de préparer une solution de contrôle à partir d'un hémolysat humain où les deux enzymes endogènes sont stabilisées par l'apport de différents protecteurs. A partir de l'ensemble de nos résultats nous pouvons proposer les modalités permettant d'obtenir des solutions de contrôle possédant des activités G6PD et PK stables, un comportement et une commutabilité trés proches de celles des échantillons des patients : -solution de contrôle liquide prête à l'emploi : hémolysat additionné de TMAO 1 mol/l, de NADP+ 0,5 mmol/l, de PEP 0,5 mmol/l et de glutathion réduit 0,1 mmol/l ; -solution de contrôle lyophilisée : hémolysat additionné de saccharose 10%, (ou tréhalose 10% ou raffinose 10%), NADP+ 0,5 mmol/l, PEP 0,5 mmol/l, N-acétylcystéine 0,25 mmol/l et d'azide de sodium 0,01% (p/v).
Fichier principal
Vignette du fichier
SCD_T_1991_0439_FATI.pdf (6.69 Mo) Télécharger le fichier
Origine : Fichiers produits par l'(les) auteur(s)

Dates et versions

tel-01747166 , version 1 (29-03-2018)

Identifiants

  • HAL Id : tel-01747166 , version 1

Citer

Mostafa Fati. Développement d'un contrôle en enzymologie érythrocytaire : application à la glucose-6-phosphate déshydrogénase et la pyruvate kinase. Médecine humaine et pathologie. Université Henri Poincaré - Nancy 1, 1991. Français. ⟨NNT : 1991NAN10439⟩. ⟨tel-01747166⟩
124 Consultations
912 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook X LinkedIn More