Chromatographie des protéines appliquée à la purification de la pénicilline acylase : modélisation de la colonne d'adsorption sur un gel d'hydroxyapatite - Université de Lorraine Access content directly
Theses Year : 1993

Chromatographie des protéines appliquée à la purification de la pénicilline acylase : modélisation de la colonne d'adsorption sur un gel d'hydroxyapatite

Claire Fargues

Abstract

Not available
Ce travail concerne la mise au point d'un procédé de purification d'une enzyme, la pénicilline acylase, par chromatographie. Nous avons établi un schéma de purification en trois étapes qui comporte une prépurification du mélange protéique brut et deux étapes chromatographiques: la première, sur support anionique faible, permet d'éliminer par adsorption plus de 90% des protéines contaminantes alors que l'enzyme passe sans se fixer. La deuxième sur support d'hydroxyapatite, termine la purification de l'enzyme, éluée sélectivement. Une étude chromatographique frontale des courbes de percée permet de séparer les mélanges initiaux en trois grandes catégories protéiques, de comportements différents vis-à-vis des supports. Pour dimensionner et optimiser la séparation chromatographique sur gel d'hydroxyapatite, nous avons réalise une étude thermodynamique de l'adsorption de la pénicilline acylase et de deux autres protéines (albumine et hémoglobine bovines). Les isothermes sont bien modélisées par des équations de Langmuir et bi-Langmuir. Une rapide étude cinétique nous permet d'apprécier les résistances au transfert de matière rencontrées par ces protéines. Ces données servent à la simulation de leur adsorption dynamique en colonne séparément et en mélanges, à l'aide d'un modèle incluant entre autre une diffusion homogène dans le grain. Les expériences monoconstituant ont mis en évidence une limitation au transfert intraparticulaire, qui semble moins grande dans le cas des mélanges binaires; cela met en évidence la variation du coefficient de diffusion avec la composition et la dénaturation protéique
No file

Dates and versions

tel-01751914 , version 1 (29-03-2018)

Identifiers

  • HAL Id : tel-01751914 , version 1

Intranet access

Cite

Claire Fargues. Chromatographie des protéines appliquée à la purification de la pénicilline acylase : modélisation de la colonne d'adsorption sur un gel d'hydroxyapatite. Autre. Institut National Polytechnique de Lorraine, 1993. Français. ⟨NNT : 1993INPL014N⟩. ⟨tel-01751914⟩
123 View
0 Download

Share

Gmail Facebook X LinkedIn More