Concept et développement d'un immunodosage par polarisation de fluorescence de biomolécules à fonction carboxyle : application à la prostaglandine E1 et au thromboxane B2 - Université de Lorraine
Theses Year : 1993

Design and development of a fluorescence polarization fluoroimmunoassay of carboxylic biomolecules: application to prostaglandine E1 and thromboxane B2

Concept et développement d'un immunodosage par polarisation de fluorescence de biomolécules à fonction carboxyle : application à la prostaglandine E1 et au thromboxane B2

Abstract

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Une des méthodes immunologiques pouvant être appliquée au dosage de biomolécules de faible masse moléculaire est la polarisation de fluorescence. Cette méthodologie a été appliquée aux biomolécules à fonction carboxyle telles que les éicosanoïdes, et en particulier au thromboxane B2, métabolite de la membrane plaquettaire impliqué dans l'hémostase et la thrombose. Les conditions opératoires d'amidification ont été optimisées après la synthèse et la purification du marqueur fluorescent, une fluorescéine fonctionnalisée par une fonction amine. La dérivation de la prostaglandine E1 (PGE1), et du thromboxane B2 (TxB2) a permis d'obtenir des traceurs fluorescents qui ont été purifiés par chromatographie sur couche mince. Leurs caractéristiques spectrales ont été déterminées. La conservation de l'immunréactivité a été vérifiée dans différents systèmes utilisant des marqueurs isotopiques ou enzymatiques. La praticabilité de l'immunodosage a été montrée pour la PGE1. La méthodologie a pu être transposée au TxB2. Le TxB2 libéré par les plaquettes après activation par un agent pro-agrégant a été dosé. Les résultats obtenus sont en accord avec les données bibliographiques
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  • HAL Id : tel-01776495 , version 1

Cite

Muriel Matt. Concept et développement d'un immunodosage par polarisation de fluorescence de biomolécules à fonction carboxyle : application à la prostaglandine E1 et au thromboxane B2. Alimentation et Nutrition. Institut National Polytechnique de Lorraine, 1993. Français. ⟨NNT : 1993INPL080N⟩. ⟨tel-01776495⟩
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