Master Thesis Year : 2005

Transferts d'énergie de différents fluorophores pour une application en PCR

Abstract

Des méthodes de plus en plus performantes pour la détection des séquences spécifiques d'ADN ouvrent des perspectives très encourageantes dans différents domaines de la Biologie que ce soit pour le diagnostic médical, l'étude de nouveaux médicaments, la génétique... A ce titre, les balises moléculaires (Molecular beacons") utilisées dans la technologie de RTPCR ("Polymerase Chain Reaction" en temps réel) constituent une nouvelle famille de sondes pour la détection et l'analyse de fragments d'ADN. Ces sondes oligonucléotidiques ont la particularité de n'être détectables (par fluorescence) que lorsqu'elles sont appariées avec le fragment d'ADN recherché et ce, de manière très spécifique. L'objet principal de cette étude a été de s'intéresser aux possibilités de créer de nouvelles sondes applicables en PCR. Cette recherche est réalisée en collaboration avec l'équipe du CRB, Nancy qui a déjà validé par cette technologie des tests pour une application dans le dépistage précoce des cancers bronchiques. Plusieurs séries d'expériences ont été ainsi réalisées afin de trouver le meilleur couple inhibiteur fluorochrome en vue de le greffer sur une sonde oligonucléotidique adaptée. De plus, des expériences de transfert de fluorescence ont permis de trouver des couples donneur-accepteur intéressants pour la synthèse de cassettes FRET("Fluorescence Resonance Energy Transfer"), composés plus sensibles que les fluorophores simples correspondants.
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Dates and versions

hal-01733314 , version 1 (14-03-2018)

Identifiers

  • HAL Id : hal-01733314 , version 1

Cite

Rémi Simon. Transferts d'énergie de différents fluorophores pour une application en PCR. Sciences pharmaceutiques. 2005. ⟨hal-01733314⟩
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