Influence of glycosylation precursors on the macroheterogeneity of IFN-g produced in bioreactor by CHO cells
Influence des précurseurs de la glycosylation sur la macrohétérogénéité de l'IFN-g produit en bioréacteur par des cellules CHO
Résumé
The aim of this work was the study of intracellular factors responsible for the macroheterogeneity of recombinant human IFN-gamma (IFN) glycosylation produced in bioreactor during batch and fed-batch cultures of Chinese Hamster Ovary (CHO) cells. Analysis of oligosaccharide precursors revealed that the structure of the lipid-linked oligosaccharides was constant over the batch process. On the contrary, the hypothesis of a quantitative limitation of the glycan structures could not be excluded. Moreover, the decline in intracellular nucleotide triphosphates and adenylate energy charge could be linked to the decrease in IFN glycosylation. This is supported by an unchanged pattern of IFN glycosylation when the cells displayed a high adenylate energy charge in a rich culture medium
L'objectif de ce travail était l'étude des facteurs intracellulaires responsables de la macrohétérogénéité de la glycosylation de l'interféron-gamma humain recombinant (IFN) produit en bioréacteur par des cultures discontinues et semi-continues de cellules CHO (Chinese Hamster Ovary). L'analyse des précurseurs oligosaccharidiques a révélé que la structure des glycannes associés aux dol-PP-oligosaccharides demeure constante tout au long du procédé. En revanche, l'hypothèse d'une limitation quantitative des structures glycanniques pouvait être envisagée. De plus, la diminution précoce des pools intracellulaires de nucléotides triphosphates et de la charge énergétique semblait être reliée à la diminution de la glycosylation. Cette hypothèse est renforcée par le fait que le profil de glycosylation de l'IFN est constant et la charge énergétique maintenue à une valeur élevée durant la phase de production de la glycoprotéine lorsque les cellules sont cultivées dans un milieu de culture riche
| Origine | Fichiers produits par l'(les) auteur(s) |
|---|